انتقال ژن GCHI به برگهای کوتیلدون کاهو با استفاده از اگروباکتریوم

نوع مقاله : علمی- پژوهشی

نویسندگان

چکیده

کاهو (Lactuca sativa) متعلق به خانواده ی asteraceae بوده و در سطح وسیع به عنوان یکی از سبزیجات برگی استفاده می شود. برگ های کوتیلدونی حاصل از جوانه کاهوی رشد کرده در شرایط آزمایشگاهی، به وسیله ی پلاسمید حامل ژن GCHI تراریخت شدند. تاثیر تعداد روزهای استقرار و همکشتی ریزنمونه‌ها در فراوانی گیاهان تراریخت مورد بررسی قرار گرفت. بعد از همکشتی، ریزنمونه‌ها به محیط باززایی محتوی 200 میلی‌گرم در لیتر سفتریاکسون و 20 میلی‌گرم در لیتر کانامایسین منتقل گردیدند. بهترین محیط کالوس‌زایی محیط MS محتوی 05/0 میلی‌گرم در لیتر NAA و 2/0 میلی‌گرم در لیتر BAP بود. بعد از انتقال کالوس‌ها به محیط MS محتوی 05/0 میلی‌گرم در لیتر NAA و 4/0 میلی‌گرم در لیتر BAP نوساقه‌ها پدیدار شدند. سرانجام نوساقه‌های تراریخت در محیط MS فاقد تنظیم‌کننده‌های رشد ریشه‌دار گردیدند. حضور ژن GCHI در گیاهان نسل‌های T0 و T1 توسط تجزیه PCR با استفاده از DNA ژنومی مورد مطالعه قرار گرفت و نتایج نشان داد که در نسل T0 از بین 52 گیاه بدست آمده، فقط 10 گیاه حامل ژن GCHI می‌باشند. میزان فراوانی نوترکیبی در این تحقیق 19% بود

کلیدواژه‌ها