بهینه‌سازی انتقال ژن مبتنی بر اگروباکتریوم به قارچ صدفی (Pleurotus ostreatus) با استفاده از ناقل حاوی ژن پروانسولین انسانی

نوع مقاله : علمی- پژوهشی

نویسندگان

چکیده

انتقال ژن‌های خارجی به قارچ‌های خوراکی با استفاده از Agrobacterium tumefaciens روشی متداول در مهندسی ژنتیک محسوب می‌شود. برای درمان دیابت نوع یک به ‌طور عمده از انسولین نوترکیب استفاده می‌شود. تولید پروانسولین در قارچ‌های خوراکی می‌تواند سبب تسهیل در تحویل خوراکی این دارو شود. در این مطالعه از باکتری A. tumefaciens برای انتقال و بیان ژن ترکیبی زیر واحد سم وبا و پروانسولین انسانی (CTB-Pins) در قارچ صدفی Pleurotus ostreatus استفاده شد. برای این‌منظور ناقل بیانی pCAMBIA1304 حاوی ژن CTB-Pins تحت کنترل پیشبرنده gpd قارچ صدفی طراحی و با استفاده از روش انتقال ژن مبتنی بر A. tumefaciens  به قارچ P. ostreatus منتقل شد. بهینه‌سازی شرایط انتقال ژن و کشت بافت از عوامل مهم در تولید قارچ تراریخت به‌شمار می‌آیند. برای این‌منظور، شرایط هم‌کشتی قارچ و باکتری، سویه‌ اگروباکتریوم و غلظت آن مورد مطالعه قرار گرفت. انتقال ژن CTB-Pins به قارچ صدفی با استفاده از آزمون PCR تایید گردید. انتقال موفق ژن به قارچ صدفی بیانگر روشی مفید برای تولید پروانسولین انسانی در قارچ‌های خوراکی می‌باشد.

کلیدواژه‌ها